NK細胞キリング

NK Cell Killing Application
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ナチュラルキラー細胞 (NK細胞) は顆粒リンパ球であり、ウイルスや腫瘍に対する自然免疫応答に関与します。NK細胞は、がん免疫療法の分野において、同種異系の “既製 ”治療薬として大きな注目を集めています。その特徴として以下が挙げられます。

  • >> 抗原感作無しで腫瘍細胞を殺傷する
    >> 複数の細胞を殺傷するため、投与量を減らすことができる
    >> サイトカイン放出症候群のリスクを軽減させる
    >> T細胞のようなHLA適合性の問題がない

ナチュラルキラー細胞の活性化と抑制性

ナチュラルキラー細胞(または大顆粒リンパ球)は、異常な細胞を殺傷します。自然免疫システムにおいて重要な役割を担うナチュラルキラー細胞は、抗腫瘍活性を制御する様々な活性化レセプターと抑制性レセプターを発現しています。

活性化レセプター​

  • NKG2D​
  • CD2​
  • NCR​
  • CD16​

抑制性レセプター​

  • KIRs​
  • CD94​
  • ILT/LIR
In vitro Natural Killer Cell (NK cells) assays to assess immunopotency for killing disease cells.  Both activating and inhibitory receptors can regulate antitumor activity

NK細胞キリングアッセイ

NK細胞による抗体依存性細胞傷害の評価
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目的: NK細胞を用いて抗体依存性細胞傷害を検証しました。NK細胞は、表面に抗体が結合した標的細胞を殺傷するため、抗体ベースの治療法評価に有用です。

Trastuzumab promotes antibody-dependent NK cell killing of A172 target cells.
Trastuzumab promotes antibody-dependent NK cell killing of A172 target cells.
Trastuzumab promotes antibody-dependent NK cell killing of A172 target cells.
Trastuzumab promotes antibody-dependent NK cell killing of A172 target cells.

がん細胞を、HER2標的モノクローナル抗体であるトラスツズマブで処理した後、CD16抗体を含むNK細胞と共培養しました。 Maestro Zプラットフォームを用いて、NK細胞によるHER2標的キリングを評価しました。 

結果: トラスツマブ処理により、NK細胞によるキリングが大幅に増強されました。

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CAR-NK 細胞のポテンシー評価
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目的: NK細胞によるターゲティングと細胞傷害性の増強を調べました。CAR-T細胞の開発と同様に、抗原の選択は、CAR-NK細胞の開発において重要です。

Cytolysis of HER2-expressing cancer cells by NK cells possessing HER2-targeting chimeric antigen receptor (CAR).
Cytolysis of HER2-expressing cancer cells by NK cells possessing HER2-targeting chimeric antigen receptor (CAR).
Cytolysis of HER2-expressing cancer cells by NK cells possessing HER2-targeting chimeric antigen receptor (CAR).
Cytolysis of HER2-expressing cancer cells by NK cells possessing HER2-targeting chimeric antigen receptor (CAR).

HER2を発現させたがん細胞に、HER2またはCD19を標的とするキメラ抗原受容体(CAR)構築物で形質導入したNK細胞を添加しました。Maestro Zプラットフォームを用いて、CAR-NK細胞による細胞傷害を測定しました。

結果: HER2を標的としたCAR-NK細胞は、CD19を標的としたNK細胞や非導入のNK細胞よりも高い効力を示しました。非導入NK細胞とHER2 CAR-NK細胞の cytolysis の差から、抗原認識と特異性がCAR-NK細胞の効力にとって重要な決定因子であることが分かりました。

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